产品货号：
GL1376
中文名称：
PAGE凝胶制备试剂盒
英文名称：
产品规格：
30T|150T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶，也可配制非变性PAGE凝胶。
保存：2～8℃，避光，有效期1年。
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围：
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| 组分 | 30T | 150T | 保存 |
| 30% Acr-Bis(29:1) | 100mL | 500mL | 4℃，避光 |
| 1.5M Tris-HCl(pH8.8) | 100mL | 500mL | RT |
| 10% SDS | 5mL | 25mL | RT |
| APS | 0.5g | 2×1g | RT |
| TEMED | 2mL | 2×5mL | 4℃，避光玻璃瓶 |
| 1M Tris-HCl(pH6.8) | 15mL | 75mL | RT |
保存：2～8℃，避光，有效期1年。
- 过硫酸铵配制成10%溶液分装后-20℃保存，应尽量减少室温存放时间以防失效，取出的APS溶液可短期4℃保存，有效避免失效的方法是分成小份，即一般用1.5mL EP管分装成0.5～1mL每支，-20℃保存，每支使用2～3次即弃用。
- TEMED极易挥发，使用后请盖紧瓶盖4℃保存，另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节TEMED的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
- 配制聚丙烯凝胶的过程中如果冬天室温较低情况下，上下层胶出现白色沉淀是正常现象，可以置于37℃水浴锅溶解后使用；冬天气温较低，分离胶凝固较慢，可将胶板置于空调下加速凝固。
- 30% Acr-Bis(29:1)有神经毒性，请小心操作，长期使用置于4℃有助于其性能的稳定。
- 在配胶过程中所使用的长短玻璃板一定要清洗干净，如有胶体附着可能会导致电泳过程中漏样的发生。
- 蛋白进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳要先分清是碱性蛋白还是酸性蛋白，分离碱性蛋白要利用低pH凝胶系统，分离酸性蛋白要利用高pH凝胶系统，酸性蛋白通常在非变性凝胶电泳中采用的是pH8.8的缓冲系统，蛋白带负电荷，向阳极移动；而碱性蛋白通常在微酸性环境下进行，蛋白带正电荷，这时候需要将阴极和阳极倒置才可以电泳分离碱性蛋白。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
- 配制10% APS：直接在0.5g APS中加入5mL蒸馏水(1g每瓶加入10mL蒸馏水)，充分溶解，分装成小份储存于-20℃或4℃。
- 根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度，按照下表配制分离胶(下层胶)：
凝胶浓度 成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(mL) 5 10 15 20 25 30 40 50 5% 蒸馏水 2.77 5.63 8.39 11.25 14.01 16.88 22.50 28.13 30% Acr-Bis(29:1) 0.83 1.67 2.50 3.33 4.167 5.00 6.67 8.33 1.5M Tris,pH8.8 1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 10 12.5 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10% APS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.02 0.024 0.032 0.04 6% 蒸馏水 2.6 5.3 7.9 10.6 13.2 15.9 21.2 26.5 30% Acr-Bis(29:1) 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 8 10.0 1.5M Tris,pH8.8 1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 10 12.5 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10% APS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.02 0.024 0.032 0.04 8% 蒸馏水 2.3 4.6 6.9 9.3 11.5 13.9 18.5 23.2 30% Acr-Bis(29:1) 1.3 2.7 4.0 5.3 6.7 8.0 10.7 13.3 1.5M Tris,pH8.8 1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 10 12.5 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10% APS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 0.015 0.018 0.024 0.03 10% 蒸馏水 1.9 4.0 5.9 7.9 9.9 11.9 15.9 19.8 30% Acr-Bis(29:1) 1.7 3.3 5.0 6.7 8.3 10 13.3 16.7 1.5M Tris,pH8.8 1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 10 12.5 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10% APS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02 12% 蒸馏水 1.6 3.3 4.9 6.6 8.2 9.9 13.2 16.5 30% Acr-Bis(29:1) 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 12.0 16.0 20.0 1.5M Tris,pH8.8 1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 10 12.5 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10% APS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02 15% 蒸馏水 1.1 2.3 3.4 4.6 5.7 6.9 9.2 11.5 30% Acr-Bis(29:1) 2.5 5 7.5 10 12.5 15.0 20.0 25.0 1.5M Tris,pH8.8 1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 10 12.5 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10% APS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02 - 如果配制非变性胶，参考上述配方，不加10% SDS即可配制成非变性PAGE胶。
- 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称堆积胶、积层胶或上层胶)
成分 配制不同体积5% SDS-PAGE浓缩胶所需各成分的体积(mL) 1 2 3 4 6 8 10 蒸馏水 0.68 1.4 2.1 2.7 4.1 5.5 6.8 30% Acr-Bis(29:1) 0.17 0.33 0.5 0.67 1.0 1.3 1.7 1M Tris,pH6.8 0.13 0.25 0.38 0.5 0.75 1.0 1.25 10% SDS 0.01 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1 10% APS 0.01 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1 TEMED 0.001 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008 0.01 - 电泳：静置，待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，避免破坏加样孔，加入Tris-甘氨酸电泳缓冲液，将待测蛋白与蛋白上样缓冲液混合，煮沸5～10min后加入样品孔，电泳，丽春红验证蛋白转膜是否成功。
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围：
| 分离胶浓度 | 最佳分离范围 | 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 5% | 60～200KD | 10% | 20～80kD |
| 6% | 50～150kD | 12% | 12～60kD |
| 8% | 30～90kD | 15% | 10～40kD |
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